酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室常用的分析和測(cè)量工具。它們的判定原則是一樣的。他們都用朗伯比爾定律來(lái)測(cè)定樣品的吸光度。那么它們之間有什么區(qū)別呢?讓我為你解釋一下它們的不同之處!

    一、酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)的三大差別

    酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的儀器又稱微孔板檢測(cè)器。可簡(jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)2大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來(lái)進(jìn)行分析。測(cè)定一般要求測(cè)試液的終體積在250μL以下，用一般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試，因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。

    分光光度計(jì)，又稱光譜，是將成分復(fù)雜的光分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。

    同為，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)定吸光度的儀器，酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)存在一些不同之處，具體差別體現(xiàn)在以下三個(gè)方面：

    (1)盛裝待測(cè)溶液的容器：

    分光光度計(jì)用的是比色皿，酶標(biāo)儀使用的是塑料微孔板(酶標(biāo)板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用，每個(gè)比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標(biāo)板常用透明的聚乙烯材料制成，對(duì)抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用，因此用它作為固相載體，酶標(biāo)板通常為48孔或96孔，每個(gè)微孔可以盛裝不同的溶液。

    (2)光路的方向：

    分光光度計(jì)是水平光路，而酶標(biāo)儀則是垂直光路。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過(guò),因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過(guò)待測(cè)溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過(guò)比色液。垂直光的特點(diǎn)是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小，不足之處是受被測(cè)樣本液面是否水平、酶標(biāo)板透光性、孔底是否平整等的影響較大。

    (3)光路的長(zhǎng)度：

    由于光密度(OD值)與吸光系數(shù), 待測(cè)組分的濃度以及光路長(zhǎng)度成正比關(guān)系。

    分光光度計(jì)采用的比色杯的寬度通常是1cm，所以光路長(zhǎng)度固定為1cm。因此不同儀器，不同批次測(cè)量的數(shù)據(jù)具有同樣的可比性。

    而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路, 所以光路的長(zhǎng)度應(yīng)該是液體液面的高度。所以測(cè)得的值受到樣品的體積的影響。

    二、酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)的優(yōu)缺點(diǎn)比較

    分光光度計(jì)：

    優(yōu)點(diǎn)：1、檢測(cè)波長(zhǎng)范圍較寬;2、加樣量不一致對(duì)測(cè)量結(jié)果沒(méi)有影響。

    缺點(diǎn)：1、工作量大，操作繁瑣，耗時(shí);2、耗試劑;3、結(jié)果穩(wěn)定性差，重復(fù)性較差，誤差較大;4、對(duì)于微量物質(zhì)，難以檢測(cè)到。

    主要應(yīng)用領(lǐng)域：藥品檢驗(yàn)、藥物分析、環(huán)境檢測(cè)、衛(wèi)生防疫食品、化工、科研等領(lǐng)域?qū)ξ镔|(zhì)進(jìn)行定性、定量分析。

    酶標(biāo)儀：

    優(yōu)點(diǎn)：1、一次性處理樣品量大，省時(shí);2、樣本、試劑用量少;3、操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，檢測(cè)速度快、效率高。

    缺點(diǎn)：1、酶標(biāo)儀96孔板在紫外光區(qū)有較強(qiáng)的紫外吸收，應(yīng)盡量避免在300nm以下使用酶標(biāo)儀進(jìn)行含量測(cè)定;2、必須確保微孔板每個(gè)孔加樣量嚴(yán)格一致，對(duì)實(shí)驗(yàn)者的操作技能提出了更高的要求。

    主要應(yīng)用領(lǐng)域：臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)等。